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专用血清能够帮助达到省时省力的目的
点击次数:36 发布时间:2022-04-26
  细胞培养过程中,若血清选择不当不仅会造成试验的失败,而且造成的人力、物力和财力的损失,特别是对异地珍惜动物品种,更是难以想象。但是,目前市场上血清种类繁多,质量参差不齐。因此研究不同种类的血清对细胞培养的影响具有十分重要的现实意义。目的就是追求高效率、低成本,通过对比试验在短时间内找到培养细胞的血清,从而达到省时、省力、省资源的目的。
  专用血清中含有丰富的细胞生长必需的营养成分,血清在体外可以再造适于细胞生长、繁殖、黏附和分化的生理环境,是组织细胞培养中常用的天然培养基,在动物细胞生长培养中起着十分重要的作用。血清中的主要成分为蛋白质、多肽、激素等,那些被发现有作用的蛋白质,主要为白蛋白和球蛋白。
  血液凝固析出的淡黄色透明液体,如将血液自血管内抽出,放入试管中,不加抗凝剂,则凝血反应被激活,血液迅速凝固,形成胶冻。其周围所析出之淡黄色透明液体即为专用血清,也可于凝血后经离心取得。在凝血过程中,纤维蛋白原转变成纤维蛋白块,所以血清中无纤维蛋白原,这一点是与血浆的区别。而在凝血反应中,血小板释放出许多物质,各凝血因子也都发生了变化。这些成分都留在血清中并继续发生变化,如凝血酶原变成凝血酶,并随血清存放时间逐渐减少以至消失。这些也都是与血浆区别之处。但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。为避免抗凝剂的干扰,血液中许多化学成分的分析,都以血清为样品。
  正常专用血清,来源于非免疫的大鼠宿主,经过脂质萃取PBS溶液透析,改善其透明度。推荐用PBS将封闭血清原液稀释5-20倍,配成5%-20%的工作液,直接滴加在组织切片或者细胞涂片上,37℃度孵育10-30分钟,清除血清,勿洗,滴加适当比例稀释的一抗工作液,37℃孵育1-2h或4℃过夜。注意:封闭用血清中不能含有目标蛋白,且与一抗来源不同,可用与二抗相同来源的封闭血清。
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