干细胞是目前医学界非常重要的研究领域，干细胞技术被广泛应用于再生医学、基因治疗以及细胞治疗等方面。干细胞无血清培养基是干细胞培养过程中使用的一种特殊培养基，相对于传统含有血清成分的培养基，它不会带来血清带来的易感染，污染，批次差异等问题，大大地提高了干细胞培养的效率和稳定性。那么接下来就让我们了解一下干细胞无血清培养基的使用方法。

 

　　使用步骤：

 

　　1、准备：拉取需要使用的培养基，放置于洁净的操作台上，旋转均匀。

 

　　2、取样：将需细胞溶解后且杂质过滤完毕的细胞悬浮液，加入到培养基中，按照比例加入适量的细胞因子，并从侧面充分旋转混合均匀。

 

　　3、孵育：将混合好的培养基，加入到预先处理过的培养皿中，贴壁培养或悬浮培养，放入孵箱中，保持恒温湿度环境。

 

　　4、观察：观察各培养皿内的细胞生长情况，代换培养基时需要小心、轻柔地抽取并加入新的干细胞无血清培养基。

 

　　使用注意事项：

 

　　1、不要将未经处理的培养基放在较高温度下，其储存的环境应为2-8℃之间，且避免阳光直射和暴露于外界空气中。

 

　　2、混合培养基时，须使用专门的匀浆装置或涡流混合器，以避免不均匀性的出现。

 

　　3、必须防止杂质污染整个细胞培养过程，并采用专门定制的颈口瓶、平底瓶等工具。

 

　　4、细胞溶解后的悬浮液在加入培养基前，必须先进行微孔滤器过滤，以避免细胞碎片或杂质进入干细胞中，影响从初级培养中筛选出良好的细胞系的筛选效率。

 

　　总之，干细胞无血清培养基的使用对干细胞方面有着重要的意义，正确的使用方法和注意事项能够为生物技术的长足进展提供保障。