专用血清能为细胞提供必要的营养和生长因子,促进细胞生长和增殖,常被用于细胞培养、免疫学实验、生物化学实验以及药理学和毒理学实验等。在储存时,通常需要将其置于-15℃至-20℃的环境中,以保持其活性和稳定性。
专用血清在使用过程中可能会遇到问题,这些问题可能会影响实验结果的准确性和重复性。以下是几种常见的问题及其相应的解决方法。

1、沉淀现象
问题描述:
在储存或使用过程中,有时会发现血清中出现不溶性的沉淀物。这通常不会影响质量,但可能会引起担忧。
解决方法:
适当处理:轻微的沉淀可以通过缓慢解冻后轻轻摇晃来分散。如果沉淀较多,可以将血清加热至56°C并持续30分钟进行灭活处理,之后再通过过滤去除沉淀。
避免反复冻融:尽量减少血清的反复冻融次数,因为每次冻融都会增加沉淀形成的可能性。
2、细胞生长不良
问题描述:
即使添加了适量的血清,细胞仍然表现出生长迟缓或形态异常的现象。
解决方法:
检查血清质量:确认所使用的血清是否符合预期的质量标准,特别是内毒素水平、总蛋白含量等关键指标。
优化培养条件:根据具体的细胞类型调整血清浓度,有时需要尝试不同的比例以找到适合的条件。此外,确保培养环境(如温度、pH值)处于良好状态也很重要。
3、内毒素污染
问题描述:
高水平的内毒素会导致细胞毒性,抑制细胞增殖甚至导致细胞死亡。
解决方法:
选择低内毒素血清:在购买时优先选择经过严格检测且标明低内毒素水平的产品。
额外处理:如果怀疑存在内毒素污染,可以考虑采用超滤或其他物理化学方法进一步降低内毒素含量。
4、pH值不稳定
问题描述:
某些情况下,它可能导致培养基pH值波动,影响细胞健康。
解决方法:
缓冲系统调整:使用适当的缓冲体系(如HEPES)可以帮助稳定pH值。
定期监测:定期检查培养基的pH值,并根据需要调整CO2浓度或更换新鲜培养基。
5、微生物污染
问题描述:
尽管大多数商业化的产品都经过严格的无菌处理,但仍有可能发生微生物污染的情况。
解决方法:
加强无菌操作:在处理血清及配制培养基时严格执行无菌技术,减少外界污染的风险。
二次过滤:对于特别敏感的实验,可以在加入细胞前对含血清的培养基进行0.2微米过滤除菌。
专用血清通过了解这些常见问题及其解决方案,研究人员可以更好地应对在使用过程中遇到的各种挑战,从而保证实验顺利进行并获得可靠的实验结果。