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及时干预一级胎牛血清问题是保障细胞健康与实验可重复性的关键
点击次数：177 更新时间：2025-11-24
一级胎牛血清虽品质优良，但在实际使用中仍常因储存不当、解冻错误或批次差异引发细胞生长缓慢、形态异常、污染风险升高甚至实验失败。科学识别并及时干预一级胎牛血清出现的问题，是保障细胞健康与实验可重复性的关键。
问题一：细胞贴壁差、增殖缓慢
原因：血清批次间差异、热灭活过度、或血清失效。
对策：
新到血清先进行小规模预实验，对比旧批次细胞生长曲线；
除非实验明确要求（如补体敏感细胞），避免常规热灭活（56℃,30min），因其会破坏部分生长因子；
若必须热灭活，严格控温并轻柔摇匀，防止蛋白变性沉淀。
问题二：培养基出现大量絮状沉淀
原因：反复冻融、高温解冻或脂蛋白析出。
对策：
正确解冻：–20℃→4℃冰箱过夜→室温缓慢融化，全程避免37℃水浴快速解冻；
解冻后轻柔颠倒混匀，切勿剧烈摇晃；
沉淀若为脂蛋白（非微生物污染），可400×g离心5分钟取上清使用，不影响细胞生长。
问题三：细胞状态突然恶化或死亡
原因：血清被支原体/病毒污染、内毒素超标或运输中温度失控。
对策：
购买时选择提供完整质检报告（含BVDV、IBRV、支原体、内毒素<10EU/mL）的供应商；
收货后立即检查冷链记录，–20℃以下保存；
怀疑污染时，更换新批次血清+新配培养基，并对细胞进行支原体检测。
问题四：实验重复性差
原因：不同批次血清成分波动影响信号通路。
对策：
一次性采购足量同一批号血清，分装保存（每管100–200mL），避免频繁开盖；
建立“主细胞库+工作细胞库”体系，减少对血清波动的依赖；
长期项目可逐步过渡至化学成分确定的无血清培养基（需工艺验证）。
