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浅述细胞适应msc无血清培养基的方法
发布时间:2021-08-17 点击次数:108次
  msc无血清培养基和试剂被广泛的应用于培养哺乳动物和无脊椎动物细胞以制备单克隆抗体,病毒抗原和重组蛋白等。大多数的产品含有向细胞内转运离子的转铁蛋白和调节葡萄糖摄取量的胰岛素,以及一些蛋白质和清蛋白,纤维蛋白,胎球蛋白等,这些蛋白在细胞培养中发挥各种不同的功能,如提供细胞贴壁所需的基质,抗生物反应器剪切力,作为脂质和其他生长分化因子的载体等。
  下面要为大家介绍的是细胞适应msc无血清培养基的方法:
  1、直接适应:细胞从添加血清的培养基转换到无血清培养基(SFM)中。
  一些类型细胞可直接从包含血清的培养基适应本产品。对于直接适应,接种细胞密度应该:2.5×10~3.5×10细胞/ml。当细胞密度达到1×10~3×10细胞/ml时,传代培养细胞。当细胞密度在培养4到7天后达到2×10~4×10细胞/ml时,细胞完全适应了。每隔3~5天,当细胞密度达到1×10~3×10细胞/ml,细胞活率在90%时,贮备的适应了本产品的细胞培养物应该再次传代培养。
  2、连续适应:分好几步把细胞从添加血清的培养基转换到本产品中,与直接适应相比较,连续适应趋向对于细胞更加温和一些。
  (1)以2倍正常接种密度接种生长活跃的细胞培养物到75%有血清培养基:25%SFM混合培养基中,传代培养。
  (2)当细胞密度>5×10细胞/ml时,以2×10到3×10细胞/ml细胞密度,在有血清培养基:SFM为50∶50的混合培养基中传代培养。
  (3)以2×10到3×10细胞/ml细胞密度,25%有血清培养基和75%SFM中传代培养。
  (4)当细胞密度达到1×10到3×10细胞/ml(接种后4到6天),在100%SFM培养基中传代培养。
  (5)每隔3到5天,当细胞密度达到1×10到3×10细胞/ml,细胞活率在90%时,贮备的适应了无血清培养基的细胞培养物应该再次传代培养。
  希望上述内容能够帮助大家更好的了解本产品。

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