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不知道了吧!omega试剂盒是这样用的
发布时间:2022-06-17 点击次数:21次
  omega试剂盒适用于反应后去除引物、酶、矿物油、甘油、盐等杂质;也同样适用于酶切、连接、磷酸化、补平或切平、随机引物等反应后的DNA纯化,纯化所得DNA可直接用于酶切、连接、转化细菌、测序、PCR、杂交等后续操作。
 
  今天小编要分享的是omega试剂盒的正确使用方法:
 
  实验开始前,各试剂均应平衡至室温,试剂不能直接在37溶解;试剂或样品配制时,均需充分混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
 
  1、加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100,余孔分别加标准品或待测样品100,注意不要有气泡,加样时将样品加于酶标板底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37温育2小时。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
 
  2、弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液100(临用前配制),酶标板加上覆膜,37温育1小时。
 
  3、弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
 
  4、每孔加检测溶液B工作液(临用前配制)100,加上覆膜,37温育1小时。
 
  5、弃去孔内液体,甩干,洗板5次,方法同步骤3。
 
  6、每孔加底物溶液90,酶标板加上覆膜37避光显色(反应时间控制在15-30分钟,当标准孔的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显时,即可终止)。
 
  7、每孔加终止溶液50,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。
 
  8、立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度(值)。

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