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NEB M0202S T4 DNA 连接酶 20000U
NEB M0202S T4 DNA 连接酶 20000U
型    号:
所属分类:NEB
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NEB M0202S T4 DNA 连接酶 20000U
■ 高效连接粘性末端和平末端
■ T/A 克隆
■ dsDNA 切刻修复

NEB M0202S T4 DNA 连接酶 20000U产品概述:

NEB M0202S T4 DNA 连接酶 20000U

特性

 

■  高效连接粘性末端和平末端
■  T/A 克隆
■  dsDNA 切刻修复
■  构建高丰度克隆文库
■  RNA 和 DNA 的连接

NEB M0202S T4 DNA 连接酶 20000U

概述

 

该酶催化双链 DNA 或 RNA 上相邻的 5′-磷酸末端和 3′-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平齐末端或粘性末端之间的连接,还可以修复双链 DNA、RNA 或 DNA/RNA 杂交双链中的单链切刻。

来源

 

纯化自 E. coli C600 pcl857 pPLc28 lig8。

反应条件

 

1X T4 DNA 连接酶反应缓冲液
[50 mM Tris-HCl(pH 7.5 @ 25℃),10 mM MgCl2,10 mM DTT,1 mM ATP]。推荐 DNA 5′ 末端浓度为 0.1-1.0 μM,16℃ 温育。
热失活:65℃ 10 分钟。

单位定义(粘性末端活性单位)

 

1 单位指在 20 μl 1X T4 DNA 连接酶反应缓冲液中,16℃ 反应条件下,30 分钟能使 50% 的经 HindⅢ 消化的λDNA 片段 [ 5′ 端浓度为 0.12 μM(300 μg/ml)] 连接所需的酶量。

浓度

 

400,000 units/ml 和 2,000,000 units/ml。

注意事项

 

与 E. coli DNA 连接酶需要 NAD+ 作辅因子不同,T4 DNA 连接酶的辅因子是 ATP。


稀释后的 T4 DNA 连接酶应于 -20℃、50% 甘油贮存缓冲液(稀释缓冲液 A,NEB #B8001)中保存。如稀释后马上使用,也可用 1X T4 DNA 连接酶反应缓冲液稀释。


只要在反应体系中补加 1 mM ATP,连接反应就可以在 NEB 提供的四种限制性内切酶缓冲液或在

T4 DNA 多聚核苷酸激酶反应缓冲液中进行。

 

T4 DNA 连接酶                      

货 号

规 格

价 格

北京库存

上海库存

#M0202L

100,000 units

 

#M0202M

(高浓度5X) 100,000 units

 

#M0202S

20,000 units

 

#M0202T

(高浓度5X) 20,000 units

 

#M0202V

10,000 units

 

 

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